Cre-lox系统介绍及使用汇总

Cre-lox系统：精准基因操控的瑞士军刀

Cre重组酶，作为基因工程领域的关键工具，通过识别和催化lox位点间的DNA重组，实现了基因的精准定位和*。lox位点，以其独特的13bp回文序列，分为识别序列和重组区域，为Cre提供了定位的锚点。Cre系统在小鼠体内展现了卓越的基因打靶能力，包括条件性基因表达与敲除，其核心在于Cre切除终止盒和同向Lox位点的协同作用。

细胞核中的CreER系统，如CreERT2，对药物诱导反应敏感，如他莫昔芬，使得在特定时间点的基因*成为可能。比如，CreER系统与Tet系统（Tet-on/Tet-off）的结合，如Cre;Tet-on和Cre;Tet-off，通过rtTA和四环素或doxycycline的*，实现精确的基因开关操作。

然而，Cre-lox系统并非全无挑战，随机转基因可能导致Cre表达的不稳定性和意外*。因此，优化Cre表达策略至关重要，例如通过定点整合来提升控制的精准性，同时避免对内源基因产生干扰，确保表达的准确性。

验证Cre的特异性表达通常依赖于Reporter小鼠，如GeneX-Cre小鼠，通过子代杂交和生殖系表达的监测来确保基因表达的精确定位。繁殖策略中，性别选择和诱导型Cre的使用也是关键考虑因素。

在基因敲除实验中，两步遗传杂交至关重要，通过对照野生型或特定基因型的动物，评估敲除效果。检测mRNA和蛋白表达变化，需确保检测方法的灵敏性和特异性，以准确评估基因*的成果。

南模生物提供多样化的Cre工具鼠和成品，如Alb-CreERT2针对肝脏的基因*，或是2Pvalb-Cre用于神经元分化研究，以及Ucp1-CreERT2和Tyr-CreERT2，分别针对棕色脂肪和黑色素细胞的特异性编辑。通过一系列实验证据，如图14至图21，生动展示了Cre-lox系统在不同组织和细胞类型的高效应用。

总的来说，Cre-lox系统以它的灵活性和精确性，成为了基因工程研究中的得力工具，为科研人员提供了在特定时间和空间内精确操纵基因的可能。

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