怎么确定一个抗体做流式时的稀释倍数

一般来说，细胞的计数方法是：细胞数/mL=4个大格细胞总数/4×10000×稀释倍
数
操作步骤：
1.取10ul细胞悬液与10ul台盼兰混合均匀于1.5ml离心管中。
2.盖上盖玻片，取10ul混合液自血球计数盘上方加入，于10倍生物显微镜下观察，活细胞不染色，死细胞被染成蓝色。
3.分别计数四个大方格，得到细胞总数，再除以4，乘以稀释倍数（本实验为2），最后乘以104，即为每ml细胞悬液中细胞数。若细胞位于线上，只计上线与左线（计上不计下，计左不计右）。

注：
1.细胞数/ml＝4大格细胞总数×稀释倍数×104/4；每一大格的体积为＝0.1cm×0.1cm×0.01cm＝10-4ml
2.计数板计数时，最适细胞浓度为5～10×105个/ml，此范围外计数误差偏大。
3.高浓度细胞悬液，可取出部分作稀释或连续稀释后计数。
例
活细胞数/方格：55，62，49，59；死细胞数/方格：5，3，4，6；细胞总数＝243
平均细胞数/方格＝60.75；稀释倍数＝2；
细胞数/ml：60.75×104×2＝1.22×106；
细胞数/flask（10ml）：1.22×106×10ml＝12.2×106
存活率：225/243﹦92.6%

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