腺病毒包装技术简介

腺病毒包装技术是目前高效可靠的重组病毒表达系统之一，其在哺乳细胞中实现瞬时及高水平的shRNA或目的蛋白表达具有显著优势。这项技术基于腺病毒载体，展现出以下特点：

首先，腺病毒的宿主范围广泛。它不仅能够感染几乎所有人的细胞类型，还能够感染包括大鼠、小鼠、兔、猪、羊、猴、鸡在内的多种动物物种的细胞，广泛适应性使其实用性得到极大提升。

其次，腺病毒的感染过程不受细胞周期的限制，这意味着它不仅可以感染快速增殖的细胞，还可以感染非增殖细胞，为研究和治疗提供了更广泛的细胞类型选择。

第三，腺病毒具有嗜上皮细胞的特性，这使得其在基因治疗领域具有显著优势。由于大多数肿瘤细胞属于上皮细胞，腺病毒的这一特性使其成为癌症基因治疗的有力工具。

此外，腺病毒的病毒滴度高，这一特性使得它在动物水平的实验中具有显著优势，为科学研究提供了强大的工具。

最后，腺病毒在生物安全性方面表现出较好的表现。它携带的基因不会整合到宿主细胞的基因组中，降低了基因突变和长期遗传影响的风险。尽管实验过程中可能出现RCA（复制型腺病毒），但鉴于大多数成人体内存在针对腺病毒的抗体，这种危害通常不大。

腺病毒表达系统中的难点主要在于怎么将外源基因表达框或者外源的shRNA表达框构建至腺病毒骨架载体上。由于腺病毒骨架载体比较大（~30kb），而且载体中的一些常用酶切位点几乎都有多个，如果用常规的酶切-连接的方式将外源基因或者shRNA表达框构建至腺病毒骨架载体上，成功率很低，因此，目前的腺病毒表达系统基本上都是用同源重组的方法将外源基因或shRNA表达框构建至腺病毒骨架载体上。

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